摘要：目的利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOFMS)建立尿路感染病原菌快速、准确的鉴定方法。方法收集2017年6月至2018年11月武汉大学人民医院中段尿培养标本4493例,采用差速离心法富集细菌,利用MALDI-TOFMS对富集后的菌液进行快速鉴定,并与传统培养1~2d后形成的菌落最终鉴定结果进行比较,同时将尿路感染常见病原菌作倍比稀释评估细菌被鉴定的最低检测限度。结果4493例中段尿标本中,775例单一菌感染且细菌数≥105cfu/mL的样本运用MALDI-TOFMS直接检测出663株菌,尿病原菌直接质谱鉴定率为85.55%(663/775),菌株的属、种鉴定符合率分别为85.55%(663/775)和83.10%(644/775);其中557株革兰阴性菌属、种鉴定符合率分别为94.80%(528/557)和94.08%(524/557),159株革兰阳性菌属、种鉴定符合率分别为71.07%(113/159)和64.78%(103/159),59例真菌属、种鉴定符合率分别为37.29%(22/59)和28.81%(17/59)。183例样本为2种菌混合感染,采用MALDI-TOFMS直接鉴定出136例样本中的1种优势菌,直接质谱鉴定率为74.32%(136/183),同时发现不同浓度的细菌计数与MALDI-TOFMS阳性率有一定的关系,在1.5×104cfu/mL革兰阴性菌比革兰阳性菌的质谱鉴定率高。结论当尿液中的细菌浓度达到一定的检测限度时,MALDI-TOFMS可以直接检测其细菌,且检出率高、结果可靠;MALDI-TOFMS对混合菌感染的样本也有一定鉴定能力,该方法能够极大地缩短病原菌的鉴定时间,为临床诊断提供有效、准确、可靠的手段。
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