胚胎细胞融合仪器CF-150B

细
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欧盟生物实验室设备与维护集团（Biologica lLaboratory Equipment, Maintenance and Service Ltd.简称：BLS）, BLS公司是欧洲一家专业生产电融合设备的厂家，尤其在胚胎干细胞的电融合上面更具有特殊的技术。BLS产品的用户遍布全球，用我们的设备发表的文章每年多达数百篇。在CELL，NATURE以及NUCLEARACID等专业杂志上经常可以见到BLS矫健的身影。其提供的大量文献与PROTOCOL给用户的科研工作带来极大的方便。

核移植是将细胞核从供体转入受体的过程。细胞核指导胚胎的发育，导致新生体出生。在这个过程中，电融合用于将供体细胞与受体卵细胞融合，并进一步激活细胞分裂，形成胚胎。Meng等人（1997）将核移植技术扩展至灵长类动物模型，克隆出恒猴。技术的进步使研究人员能够从分裂球进展至更高分化的胚胎细胞以及静止的胚儿细胞，作为核的供应来源。胚胎产生的细胞在体外培养6-13代，然后在转入前使用血清饥饿的方法使细胞静止。

如前文所述，Roble、Cibelli以及Stice是在1998年报告使用非老化胚成纤维细胞作为核的供体进行核移植而产生绵羊克隆转基因牛的人。IanWilmut在1996年震惊了整个世界，他从成年乳腺的细胞产生出头个动物克隆——多利。使用分化的成年细胞进行克隆的能力打开了核移植广泛运用的大门即基因的令人激动的模式。成功事例PPLTherapeutics公司从成年体细胞克隆出猪。对于这些用途可以使用多种细胞融合样品池及微型载玻片。

细胞融合仪
CF-150B胚胎细胞融合仪器和相关电极槽(GSS-250)专为哺乳动物胚胎分裂球电融合而设计，可在电解液或非电解液中运用。一个适当导向的短电脉冲施加在早期胚胎可以溶解细胞膜，从而完成细胞质和细胞核融合。此仪器的主要应用是产生小鼠四倍体胚胎产生和体细胞核转移克隆。标准的双细胞分裂期胚胎能够迅速地融入单个细胞（单细胞分裂期四倍体胚胎）。这种四倍体胚胎可用于与遗传控制小鼠胚胎干细胞（ES）聚合，从而产生完全的ES衍生细胞胎儿(Nagyetal.,1990;NagyandRossant;1993)。

随着ES细胞遗传控制技术的发展，ES衍生细胞胚胎有了更广阔的应用空间：

1、应用于测试新衍生的或遗传控制的胚胎干细胞的发育潜能(Nagy et al., 1993).
2、完全ES衍生细胞胎儿为不同功能或遗传研究提供丰富的组织和器官前身资源(Forrester et al. 1991).
3、*近，gene-trap战略用于完全衍生ES胚胎聚合，此胚胎由ES四倍体细胞胚胎产生，从而获取基因表达模式的直接信息CF-150B

细胞融合仪和专业设计的高精度电极槽一起使用。槽有三种不同的缝间隙，250μm,500μm和1000μm，型号名分别为GSS-250,GSS-500和GSS-1000。在做双细胞期分裂球融合时，任何一种槽均可使用。如果用于克隆目的，我们推荐GSS-250。电极材料是高品质不锈钢的，并将其安置在一种厚玻璃中。所有这些材料无毒。CF-150B细胞融合仪器和专业设计的电极夹GSH-1一起使用．此“快速夹”设计使得电极牢固夹在组织培养板（或其盖上）。在融合过程中**不会有偶然的滑动，并且给电极线提供了长久的良好接触。电极夹可用于三种里任何一种电极GSS-250,GSS-500orGSS-1000。

CF-150B细胞融合仪器和新型设计的聚合针DN-10一起使用．在组织培养板底部形成一个小凹陷以便小胚胎的聚集，例如胚胎、ES细胞块以及移植早期的鼠胚胎。和附件球一起使用，这些针头更符合人体动力学，在使用中减少手指和手的压力。

CF-150B细胞融合仪器和聚合针头DN-09一起使用．聚合针DN-09是*早期设计的聚合针头，在组织培养板底部形成一个小凹陷以便小胚胎的聚集，例如胚胎、干细胞以及移植早期的鼠胚胎。

如果所有参数都选择完善(完全按照BLS的protocol)，融合率将高于90%，胚胎在融合过程中死亡率低于10%，并且24小时内至少80%成功融合的胚胎将成长为健康的四细胞期胚胎。