摘要：目的探讨上海交通大学医学院附属瑞金医院分离的5株泛耐药阴沟肠杆菌产碳青霉烯酶及16SrRNA甲皋化酶的情况及两者之间的相关性。方法用Etest法检测5株泛耐药阴沟肠杆菌对10种抗菌药物的MIC值。PCR扩增16SrRNA甲基化酶基因armA、mtA、rmtB、rmtC、rmtD、npmA，β-内酰胺酶基因TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-8、CTX-M-9、CTX-M-25、PER-1、VEB-1。鸟枪克隆法克隆碳青霉烯酶基因，并对克隆片段进行测序。质粒接合试验验证碳青霉烯酶基因及16SrRNA甲基化酶基因是否具有转移性。脉冲场凝胶电泳（PFGE）法对5株菌进行分子分型。等电聚焦电泳法检测β-内酰胺酶等电点。Southern杂交法对耐药决定因子进行定位。结果5株阴沟肠杆菌对10种抗菌药物的MIC值均〉32mg／L。克隆的碳青霉稀酶基因为bla。。，酶编码基因上游为一转座酶基因，两侧为复制靶位，下游为Is蜘桶的插入序列，该序列包括一个重复序列和tnpA转座子，酶编码基因位于54．2kb的一个非接合性大质粒上。等电聚焦电泳显示5株菌均产4种β-内酰胺酶（TEM-1，p15．4；KPC-2，p16．7；SttV-12，p18．2；CTX-M-14，p18．4）。16SrRNA甲基化酶基因位于接合性质粒上，而blakpc-2基因则位于非接合性质粒上，5株菌PFGE型别一致。结论5株泛耐药阴沟肠杆菌对碳青霉烯类耐药由产碳青霉烯酶KPC-2所介导。blakpc-2与armA型16SrRNA甲基化酶基因由两条不同的质粒编码，不存在相关性。临床医院应加强监控，以防止交叉感染。
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